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大牛实验室是怎么提取外泌体

行业新闻 2021-08-30

做外泌体的小伙伴们都在愁怎么提取外泌体,选择哪个好,我们身边的小伙伴们,尤其是在大牛实验室的小伙伴们是怎么提取的呢?小编特意查阅了近两年的国内IF大于10(2017最新影响因子)的外泌体文章,pubmed搜的文章统计可能不是很完全,可能会有疏忽,如果没有被纳入可以在下方留言给我们,请大家包涵啦~~~

1. 中科院健康所陈国强院士团队:外泌体的自分泌信号途径调节造血功能

Sorting protein VPS33Bregulates exosomal autocrine signaling to mediate hematopoiesis andleukemogenesis. J Clin Invest. 2016. IF=13.251

本文首发自博雅干细胞,作者 武汉大学 Chen  专家审核:江苏大学附属医院 李晶 教授  近年来,干细胞外泌体被广泛应用到了疾病的临床治疗研究中,比如此次新冠肺炎的临床救治探索中也应用到了干细胞外泌(图1)

超速离心法,110000g×80min

文章详细介绍:

JCI:中科院健康所发现外泌体的自分泌信号途径调节造血功能

2. 武汉大学口院医学院:囊泡的磁/叶酸修饰策略简化囊泡分离并提高其肿瘤靶向性

Magnetic and Folate Functionalization Enables Rapid Isolation and Enhanced Tumor-Targeting of Cell-Derived MicrovesiclesACSNano2016.  IF=13.709

本文首发自博雅干细胞,作者 武汉大学 Chen  专家审核:江苏大学附属医院 李晶 教授  近年来,干细胞外泌体被广泛应用到了疾病的临床治疗研究中,比如此次新冠肺炎的临床救治探索中也应用到了干细胞外泌(图2)

MV大囊泡提取,50000g×60min离心

文章详细介绍:

武汉大学口院医学院:囊泡的磁/叶酸修饰策略简化囊泡分离并提高其肿瘤靶向性

3. 南京大学张辰宇教授等:PKM2磷酸化SNAP-23促进肿瘤外泌体的释放

Pyruvate kinase type M2 promotes tumour cell exosome release via phosphorylating synaptosome-associated protein 23Nat Commun. 2017. IF=12.353本文首发自博雅干细胞,作者 武汉大学 Chen  专家审核:江苏大学附属医院 李晶 教授  近年来,干细胞外泌体被广泛应用到了疾病的临床治疗研究中,比如此次新冠肺炎的临床救治探索中也应用到了干细胞外泌(图3)

超速离心法提取细胞上清液+沉淀试剂盒 

文章详细介绍:

Nature Communications:PKM2磷酸化SNAP-23促进肿瘤外泌体的释放

4. 中科院神经所杜久林研究组:神经元分泌含有miR-132的外泌体调节大脑血管完整性

Neurons secrete miR-132-containing exosomes to regulate brain vascular integrityCell Res. 2017.  IF=15.393

神经细胞外泌体的提取,沉淀试剂盒

文章详细介绍:

Cell Research:中科院神经所发现外泌体对脑血管完整性的神经调节机制

5. 中科院耿美玉课题组&孙兵课题组:外泌体分泌双链DNA介导化疗诱导的肠炎症反应

Chemotherapy-induced intestinal inflammatory responses are mediated by exosome secretion of double-strand DNAvia AIM2 inflamma some activation. Cell Res. 2017. IF=15.393

血液外泌体提取,试剂盒

文章详细介绍:

中科院生化所与上海药物所合作揭示肿瘤化疗引起的肠道毒性的分子机制

6.天津医科大学巴一、应国光教授:外泌体传递EGFR调节肝脏微环境促进胃癌肝转移

Exosome-delivered EGFR regulates liver microenvironment to promote gastric cancer liver metastasis. Nat Commun. 2017. IF=12.353 

血清和细胞上清提取,超速离心110000g×70min

文章详细介绍:

【Nature子刊】天津医科大学肿瘤医院巴一教授、应国光教授:外泌体传递EGFR调节肝脏微环境促进胃癌肝转移

7. 天津医科大学尹海芳教授:树突状细胞外泌体的抑癌作用

Dendritic cell-derived exosomes elicit tumor regression in autochthonous hepatocellular carcinoma mouse models. J Hepatol. 2017. IF=14.911

DC细胞来源外泌体,100000g超速离心

8. 杨安钢教授、张瑞教授:外泌体参与miRNA-7在TRAIL介导的凋亡并抑制肿瘤生长

Identification of miRNA-7 by genome-wide analysis as a critical sensitizer for TRAIL-induced apoptosis in glioblastoma cells. Nucleic Acids Res. 2017.IF=11.561

细胞培养液,120000g超速离心

9. 国家纳米科学中心、中科院力学所:基于粘弹性的微流体系统分离外泌体的方法

Field-Free Isolation of Exosomes from Extracellular Vesicles by Microfluidic Viscoelastic Flows. ACS Nano. 2017. IF=13.709

A549细胞,超速离心+微流控芯片

10. 湖南大学谭蔚泓组开发出一种可视化的外泌体表面蛋白检测传感器平台

Aptamer/AuNP Biosensor for Colorimetric Profiling of Exosomal Proteins. Angew Chem IntEd Engl. 2017. IF=12.102

HeLa PC-3等肿瘤细胞100000g 超速离心

11. 上海交通大学附属第一人民医院李莉教授:肥大细胞外泌体通过结合IgE抑制过敏反应

Mast cell exosomes can suppress allergic reactions by binding to IgE. J Allergy Clin Immunol. 2017. IF=13.258

BMMC外泌体通过离心法得到

12. 西北农林科技大学孙超教授:褪黑素促进脂肪分泌外泌体、增加外泌体α酮戊二酸水平,外泌体α酮戊二酸转移到巨噬细胞后缓解脂肪炎症

Melatonin alleviates adipose inflammation through elevating alpha-ketoglutarate and diverting adipose-derived exosomes to macrophages in mice. J Pineal Res. 2017. IF=11.613

鼠eWAT 细胞100000g超速离心2h+密度梯度离心

13. 厦门大学刘刚教授:基因工程化的脂质体样纳米膜泡作为高效的药物靶向递送平台

Genetically Engineered Liposome-like Nanovesicles as Active Targeted Transport Platform. Adv Mater. 2017. IF=21.950

改造的外泌体经5–60%蔗糖密度梯度超速离心,200000g×14h

14. 浙江大学张龙组与苏州大学周芳芳组合作发现肿瘤外泌体抑制宿主先天抗病毒免疫的机制

Tumor-derived exosomes antagonize innate antiviral immunity. Nat Immunol. 2018. IF=21.809

超速离心,100,000 × g for 17 h

文章详细介绍:

Nature Immunology:浙大张龙组与苏大周芳芳组合作发现肿瘤外泌体抑制宿主先天抗病毒免疫机制丨国内外泌体大文章+1

15. 厦门大学颜晓梅教授、苏国强主任合作开发流式细胞仪用于结直肠癌患者细胞外囊泡大小和蛋白质谱的检测分析

Protein Profiling and Sizing of Extracellular Vesicles from Colorectal Cancer Patients via Flow CytometryACS Nano. 2018.  IF=13.709

细胞上清液100000g 离心2h

文章详细介绍:

【ACS Nano】超高灵敏流式检测技术实现粒径低至40 nm细胞外囊泡的单颗粒水平多参数定量分析

16. 第二军医大学王红阳院士、杨文副研究员合作揭示外泌体miRNA在肝癌肺转移中的新机制——肿瘤来源的外泌体miR-1247-3p诱导癌症相关成纤维细胞活化以促进肝癌的肺转移

Tumor-derived exosomal miR-1247-3p induces cancer-associated fibroblast activation to foster lungmetastasis of liver cancer. Nat Commun. 2018.  IF=12.353

细胞培养液和血清通过超速离心法提取

(方法引用文献Isolation and characterization of RNA-containing exosomes)

文章详细介绍:

王红阳院士团队Nature Conmmunications杂志揭示外泌体miRNA在肝癌肺转移中的新机制

17. 华中科技大学同济医学院:选择性靶向RAB27B抑制外泌体释放miR-34c-5p可诱导急性髓性白血病干细胞衰老

miR-34c-5p promotes eradication of acute myeloid leukemia stem cells by inducing senescence through selective RAB27B targeting to inhibit exosome shedding. Leukemia. 2018.  IF=10.023

KG-1a细胞120000g 离心2h

18. 中山大学庄诗美、方坚鸿、元云飞教授:肝癌细胞分泌的外泌体microRNA-103通过靶向连接蛋白增加血管通透性并促进癌细胞转移

Hepatoma cell-secreted exosomal microRNA-103 increases vascular permeability and promotes metastasis by targeting junction proteinsHepatology.2018.  IF=14.079

超速离心法,110,000 g for 70 minutes

19. 美国宾夕法尼亚大学施松涛教授、北京大学口腔医院周彦恒教授合作研究:外泌体及其miRNAs的分泌受Tet1和Tet2调控并参与间充质干细胞稳态维持

Tet1 and Tet2 maintain mesenchymal stem cell homeostasis via demethylation of the P2rX7 promoter. Nat Commun. 2018. IF=12.353

BMMSC细胞超速离心,120,000 × g for70 min

文章详细介绍:

Nature子刊:外泌体及其miRNAs的分泌受Tet1和Tet2调控并参与间充质干细胞稳态维持

20. 中山大学谭家莉教授:利用外泌体-脂质体在MSCs 中递送CRISPR/Cas9系统

Exosome-Liposome Hybrid Nanoparticles Deliver CRISPR/Cas9 Systemin MSCs. Adv Sci. 2018. IF=12.411

HEK293FT细胞培养液,PEG6000聚沉